UV2000紫外可見(jiàn)分光光度計的工作原理敘述

　　根據量子光學(xué)理論，波長(cháng)是能量的倒數，波長(cháng)短能量大，容易產(chǎn)生雜散光，而220nm處屬于短波部分；根據儀器學(xué)理論中的電光源理論，氘燈在220nm處能量很小，即信號很小，容易顯現雜散光。

　　通過(guò)溶液的光必須是平行的;通過(guò)溶液的光必須是單色光;待測溶液必須是純凈的、均勻的且濃度不宜過(guò)高，這是瑯伯-比爾定律首要的三個(gè)前提條件。但是在實(shí)際的紫外可見(jiàn)分光光度計的制造和使用過(guò)程中這三個(gè)條件是不可能達到的。因為光是直線(xiàn)傳播的，在分光光度計制造過(guò)程中，燈源發(fā)出的光是發(fā)散的，經(jīng)過(guò)聚焦鏡進(jìn)行聚焦等直到經(jīng)過(guò)溶液的整體過(guò)程中，光是不可能平行的。

　　燈源發(fā)出的光是復合光，經(jīng)過(guò)狹縫，再經(jīng)過(guò)光柵分光等步驟，因為受到狹縫和光柵本身的限制，光柵分光不可能達到純單色光。還有光度計的整體設計問(wèn)題，光度計不可能沒(méi)有其它的雜光存在。用戶(hù)的溶液也不可能是純凈的，也會(huì )含有一些雜質(zhì)，這些對光度的吸收都會(huì )存在影響。

　　除以上三個(gè)方面的影響外，在實(shí)際的光度計應用過(guò)程中還會(huì )存在其他因素的影響，例如：經(jīng)過(guò)比色皿的光是否垂直;比色皿寬度是否為10mm的標準值;測試波長(cháng)是否準確;程序設計是否存在漏洞等等，都會(huì )直接影響到利用瑯伯-比爾定律計算出的結果。所以在日常的測試過(guò)程中，得出的結果和瑯伯-比爾定律有些偏差是很正常的，只是我們關(guān)注偏差多少的問(wèn)題。

　　因此，UV2000紫外可見(jiàn)分光光度計只測試220nm處的雜散光，不測試340nm處的雜散光，這樣是不正確的，需測試220nm處雜散光。因為根據儀器學(xué)理論中的光電發(fā)射理論，光電倍增管在220nm處的光譜響應（靈敏度）低，容易顯現雜散光。而測試340nm處雜散光的原因是*不同的，因為340nm處一般是氘燈換鎢燈和儀器調換濾光片的地方，此時(shí)zui容易產(chǎn)生雜散光。

　　所以，對于UV2000紫外可見(jiàn)分光光度計來(lái)講，應該測試220nm和340nm兩處的雜散光。UV2000紫外可見(jiàn)分光光度計雜散光測試步驟，首先將參比液注入配對石英石吸收池，分別放置在參比池座和試樣池座內。再測定波段掃描基線(xiàn)并使之平滑。將減光片插入試樣光路的濾光片槽內，其讀數即為減光片的衰減值K，然后將減光片插入參比光路的濾光片座內，將石英吸收池中的蒸餾水依次換成上述截止濾光液，插入試樣試樣池座中，在相應的波段內掃描、打??；在記錄紙的作標上量取測定波長(cháng)處的透光度，乘以衰減值K，即得各測定波長(cháng)處的雜散光值。