紫外可見(jiàn)分光光度計的用途和主要指標介紹

紫外可見(jiàn)分光光度計是基于紫外可見(jiàn)分光光度法原理，用來(lái)測量待測物質(zhì)對可見(jiàn)光或紫外光（200～760nm）的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器?？梢詼y定核酸和蛋白的濃度，也可以測定細菌細胞密度。

 

紫外可見(jiàn)分光光度計的用途介紹：

 

1、對物質(zhì)進(jìn)行分析鑒定，紫外可見(jiàn)分光光度計在制藥行業(yè)有著(zhù)很大的前景。根據國內外的書(shū)籍記載，已經(jīng)把很多的藥品紫外線(xiàn)吸收波長(cháng)和相對應的詳細參數記錄起來(lái)，給藥品分析帶來(lái)了很大的方便。

 

2、對比分析，把需要測定的樣品與標準樣品放在同等環(huán)境下進(jìn)行測量。如果兩種樣品得到的檢測結果*一樣，就表明這兩種樣品是同種物質(zhì)。要是沒(méi)有標準樣品的話(huà)，可以選擇跟已知的標準圖譜對比分析，這種辦法對儀器的要求相當高，檢測環(huán)境要求*。

 

3、在化學(xué)學(xué)科上的應用，其可以檢驗化學(xué)物質(zhì)的純度，同時(shí)也可以推算物質(zhì)的原子結構，還可以對物質(zhì)之間的氫鍵進(jìn)行測定。特別是在有機化學(xué)方向的運用，前景更是廣闊，能夠對成分比較復雜的有機化合物進(jìn)行成分鑒定。

 

紫外可見(jiàn)分光光度計的主要指標介紹：

 

(1)波長(cháng)范圍

波長(cháng)范圍是指儀器上、下限波長(cháng)之間的工作范圍，是與光源色器及檢測器的光譜響應特性有關(guān)。有的儀器在波長(cháng)范圍兩端缺乏足夠的能量，難以正常工作。

(2)波長(cháng)準確度

波長(cháng)準確度是指儀器測定時(shí)標稱(chēng)的波長(cháng)值與儀器出射的光線(xiàn)實(shí)際波長(cháng)值參考值或理論值）之間的符合程度，一般用多次波長(cháng)測量值平均值與參考值之差（即波長(cháng)誤差）來(lái)衡量。

(3)波長(cháng)重復性

波長(cháng)重復性是儀器在相同測試條件下、一個(gè)較短的時(shí)間內，對同一吸收或發(fā)射譜線(xiàn)進(jìn)行連續多次波長(cháng)測量，測量結果的一致性。也稱(chēng)波長(cháng)精密度，即多次波長(cháng)測試數據的符合程度。波長(cháng)重復性一般用多次波長(cháng)測試數據的離散性，即取波長(cháng)準確度多次測試結果中最大值與最小值之差來(lái)衡量。

(4)光譜帶寬

光譜帶寬指從經(jīng)過(guò)單色器后從出射狹縫出來(lái)的單色光的譜線(xiàn)輪曲線(xiàn)中峰高一半高度處的譜帶寬度。光譜帶寬可以表征儀器的光譜分辨率。光學(xué)帶寬越小越好，儀器一般可通過(guò)調窄狹縫，使光譜帶寬變小，但是同時(shí)光源能量弱，可能影響儀器對信號的檢測，降低儀器的靈敏度。光源輝線(xiàn)或一些較尖銳的吸光譜都可用于光譜帶寬的檢查。

(5)雜散光

雜散光是指到達檢測器的任何被測波長(cháng)以外的其它波長(cháng)的光。一般用在某規定的波長(cháng)下測定在理論上該波長(cháng)下*不吸收的某種標準物質(zhì)的透射比來(lái)衡量。如紫外區可用Nal溶液測定波長(cháng)為220nm處的雜散光，在可見(jiàn)區可用各種有色玻璃截止濾光片。雜散光是光譜測量中誤差的主要來(lái)源。雜散光越小越好。

(6)分辨率

分辨率是指儀器對于緊密相鄰的峰可分辨的最小波長(cháng)間隔，是衡量分光光度計性能的重要指標之一。單色器輸出的單色光的光譜純度、強度以及檢測器的光譜靈敏度等是影響儀器分辨率）主要因素。新版的檢定規程已取消分辨率要求，一般可用最小光譜帶寬來(lái)衡量。

(7)光度準確度與透射比誤差

光度準確度是吸光度測量的準確程度，一般用透射比標準物質(zhì)實(shí)測吸光度值與其標準值之差（吸光度誤差）衡量。因為吸光度誤差在整個(gè)量程范圍內的示值是非線(xiàn)性的》，因此用吸光度表示光度準確度時(shí)，必須定其吸光度范圍。光度準確度也可用透射比表示，即透射比準確度，一般用透射比誤差（實(shí)測透射比值與其標準值之差）來(lái)衡量。透射比誤差是一個(gè)反映儀器綜合性能的指標，與波長(cháng)準確度、雜散光、儀器穩定性等眾多因素有關(guān)。

(8)光度重復性與透射比重復性

光度重復性是在相同的儀器上、相同條件如儀器波長(cháng)、光譜帶寬不變，在短時(shí)間對同一樣品進(jìn)行多次重復測定吸光度，所測得值的一致性。光度重復性是影響分析結果可靠性的最主要因素，是關(guān)鍵性技術(shù)指標，一般用多次重復測量吸光度的最大值與最小值之差來(lái)衡量。如按同樣方式測定透射比，即為透射比重復性。

(9)噪聲

噪聲是信號隨時(shí)間而無(wú)規則的變化。噪聲測量的方法是在儀器預熱穩定后，在一定波長(cháng)和一定光譜帶寬下，分別掃描透射比100%或O透射比幾分鐘(一般取2min)，量取獲得圖譜中最大值至最小值之間的值作為絕D噪聲水平。如掃描較長(cháng)時(shí)間，一般30min，可獲得漂移。但在實(shí)際測定中，常用信噪比來(lái)描述儀的性能，如在100%線(xiàn)掃描時(shí)，噪聲是1%，則信噪比為100：1。這個(gè)指標也是越小越好。

(1O)基線(xiàn)平直性

基線(xiàn)平直性是吸收池中不放任何東西時(shí)掃描基線(xiàn)(100%T線(xiàn)或OA線(xiàn)），基線(xiàn)傾斜彎曲的程度，它是儀器的重要性能指標之一。一般用掃描圖譜中起點(diǎn)吸光度與偏離起點(diǎn)吸光度（取最大偏離點(diǎn)）之差來(lái)衡量。