會(huì )使紫外-可見(jiàn)分光光度計不準確的因素

會(huì )使紫外-可見(jiàn)分光光度計不準確的因素

     當以空白試劑為參比調節儀器零點(diǎn)時(shí)，比色皿窗材料的吸收、內外窗面的散射以及溶劑的吸收等都被抵消，所得吸光度值*由顯色溶液中待測離了濃度所決定。此時(shí)吸光度值與試液濃度一般呈線(xiàn)性關(guān)系。吸光度值與測定濃度不成直線(xiàn)關(guān)系，發(fā)牛向下彎曲(負偏離)或向上彎曲(正偏離)的現象而偏離朗伯一比爾定律的主要原因如下。

      (1)非單色光的影響 紫外一可見(jiàn)分光光度訃使用連續光源和分光器分光，不可能得到真正理想的單色光；為保證在測量中能得到充分的光強，儀器必須保持一定的狹縫寬度。由狹縫射出后投射到被測物質(zhì)上的光，是一個(gè)有限寬度的譜帶——光譜通帶。隨光譜通帶寬度的增大，吸收光譜的分辨率降低，并偏離朗伯一比爾定律。 

     (2)非吸收光的影響 當來(lái)自出射狹縫的光的光譜通帶寬度大于吸收光譜譜帶時(shí)，投射在被測物質(zhì)上的光就含有非吸收光。這不僅能使靈敏度降低，且能使校準曲線(xiàn)向橫坐標軸彎曲而偏離朗伯一比爾定律。

     (3)非平行光的影Ⅱ向 當入射光與比色皿的光學(xué)面不垂直時(shí)，通過(guò)被測物質(zhì)的實(shí)際光程就大于比色皿的厚度。這種情況所造成的影響很小，一般可忽略不計。

     (4)散射的影響 當被測物質(zhì)不均勻，其巾含有微小顆粒物，如懸浮物或膠態(tài)粒子等散射質(zhì)點(diǎn)時(shí)，入射光通過(guò)該物質(zhì)就會(huì )使部分光被散射而損失，從而減小了透射光的性度，增大了實(shí)際吸光度，導斂偏離朗伯一比爾定律。

     (5)熒光的影響某些物質(zhì)吸收光后能再新輻射出波長(cháng)和入射光波長(cháng)相近的熒光而導致朗們一比爾定律失效。 

 (6)化學(xué)反應的影響 在被測溶液中待測組分發(fā)發(fā)生解離、締合、光化等作用，或與溶劑相互作都將使待測組分的吸收曲線(xiàn)發(fā)生明顯的改變，如吸收峰的形狀、位置、強度以及精密結構都會(huì )發(fā)生變化，從而導致偏離朗伯一比爾定律。

     (7)溶劑的影響 溶劑對吸收光潛的影響頗為zui要。輔射能引起某化合物的分解而導致偏離朗們比爾定律。