雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計是一種廣泛應用于化學(xué)、生物、環(huán)境等領(lǐng)域的精密儀器。
一、原理
雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計基于比較樣品溶液與參比溶液對不同波長(cháng)的光的吸收和透射程度的差異，從而進(jìn)行定量分析。其基本原理如下：
1.光源發(fā)射：通常采用氘燈作為紫外光源和鎢燈作為可見(jiàn)光源。氘燈主要用于紫外區域，鎢燈主要用于可見(jiàn)區域。
2.分束系統：光源發(fā)射的光線(xiàn)通過(guò)準直系統進(jìn)入分束器，分束器將光線(xiàn)分為兩束，一束作為參比光束，另一束作為樣品光束。
3.樣品測量：參比光束和樣品光束分別通過(guò)樣品池，樣品池中放置著(zhù)待測樣品溶液。根據樣品溶液的吸收特性，將吸收光信號轉化為電信號。
4.檢測系統：光電二極管將參比光束和樣品光束的光信號轉化為電信號，并通過(guò)放大器進(jìn)行放大。
5.數據處理：通過(guò)將參比光信號和樣品光信號作差，并經(jīng)過(guò)一系列計算和校正，得到最終的吸光度值。
二、結構
通常由以下幾個(gè)主要部分組成：
1.光源：包括氘燈和鎢燈，分別負責紫外和可見(jiàn)光區域的光源發(fā)射。
2.分束器：將光源發(fā)射的光線(xiàn)分為參比光束和樣品光束。
3.樣品池：用于放置待測樣品溶液的容器，通常是石英或玻璃制成。
4.光電傳感器：用于將光信號轉化為電信號，常用的光電傳感器有光電二極管。
5.放大器：對光電傳感器輸出的電信號進(jìn)行放大。
6.數據處理系統：對放大后的信號進(jìn)行計算、校正和顯示，得到最終的吸光度值。
三、工作方式
雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計的工作方式主要包括以下幾個(gè)步驟：
1.校零：將樣品池中的溶劑作為參比光束和樣品光束的參考，進(jìn)行校零操作，消除光源和光學(xué)系統的背景。
2.加載樣品：將待測溶液放置到樣品池中，確保樣品在透射光線(xiàn)路徑中。
3.掃描光譜：通過(guò)改變分光光度計的波長(cháng)或重置濾光片，對一段波長(cháng)范圍內的吸光度進(jìn)行掃描。
4.記錄數據：將吸光度數據記錄下來(lái)，并可通過(guò)連接計算機進(jìn)行數據存儲和進(jìn)一步分析。
四、應用
廣泛應用于化學(xué)、生物、環(huán)境等領(lǐng)域的定量分析和質(zhì)量控制。它的應用包括但不限于以下幾個(gè)方面：
1.藥物分析：用于藥物含量的測定、質(zhì)量評價(jià)和藥代動(dòng)力學(xué)研究。
2.生物分析：用于蛋白質(zhì)、核酸和酶等生物大分子的定量分析。
3.環(huán)境監測：用于水體、大氣和土壤中污染物的測定和追蹤。
4.食品安全：用于食品中添加劑、殘留物和營(yíng)養成分的定量分析。
5.化學(xué)研究：用于化合物濃度測定、反應動(dòng)力學(xué)和光譜特性研究。
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